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1. 对光：转动转换器，将低倍物镜对准通光孔(物镜前端距载物台约2厘米)；调整遮光器，选择较大的光圈对准通光孔；左眼看目镜，右眼睁开，转动反光镜(平面镜或凹面镜，根据光线强度调整)，直到视野呈现明亮均匀的圆形。

2. 放置标本：

- 观察玻片标本:将待观察的玻片标本(如洋葱表皮细胞临时装饰)放在载物台上，用压片夹固定，确保标本面向通光孔中心；

- 在培养过程中观察活体细胞(如动物细胞)：在使用倒置生物显微镜时，将装有活体细胞的培养皿平稳地放置在载物台上(不需要压片夹)。

3. 低倍镜观察:旋转粗准焦螺旋，使镜筒缓慢下降(眼睛从侧面看物镜，防止物镜压碎玻片或损坏镜头)，直到物镜接近标本(约1-2毫米)。；左眼睛盯着眼镜，反转粗准焦螺旋，使镜筒慢慢上升，当看到模糊的图像时，调整细准焦螺旋，直至图像清晰。

4. 观察高倍镜(如果需要更仔细的观察)：

- 找出低倍镜下的目标图像，调整玻片位置，将目标移至视野中央；

- 转换器，更换高倍物镜(注意：高倍物镜镜头较长，不能硬转)；

- 调整细准焦螺旋(不要使用粗准焦螺旋，以免压碎标本或损坏镜头)，同时调整遮光器(更换较大光圈)或反光镜(更换凹面镜)，增加视野亮度，直至图像清晰。

首先，区分观察对象是活体细胞还是玻璃:活体细胞需要放在培养皿中，放在显微镜工作台上，用倒置生物显微镜观察；玻璃直接将准备好的载玻片放在正面或倒置生物显微镜的工作台上。打开显微镜光源后，将需要倍率的物镜垂直对准载玻片或培养皿，通过调焦装置调节焦距，直到成像清晰。通常先用低倍率物镜找到图像，然后逐一更换大倍率物镜。