2023年高考生物二轮复习（人教版） 第3篇 考前特训 专项三 (五)生物技术与工程.docx

(五)生物技术与工程
1．(2022·四川成都高三模拟)泡菜传统自然发酵方式的发酵周期相对较长，生产效率低。研究人员欲从泡菜中分离筛选出高产酸乳酸菌，为泡菜工厂化生产提供依据。请分析并回答下列问题：
(1)配制CaCO3－MRS培养基。成分：蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、磷酸氢二钾、葡萄糖、琼脂粉、碳酸钙等。
①根据物理性质分类，该培养基属于____________培养基，为乳酸菌种提供氮源的成分是____________________；
②培养过程中，乳酸菌产生乳酸溶解碳酸钙，形成溶钙圈，便于__________________。
(2)高产酸乳酸菌的培养与分离。其部分实验目的与具体操作如下所示，请完成下表。
实验目的
简要操作过程
梯度稀释
在无菌条件下取样品中泡菜汁1 mL，加入①________进行10倍梯度稀释，依次得到10－5、10－6、10－7的稀释液
接种培养
取上述稀释液1 mL分别加入无菌培养皿中，然后将CaCO3－MRS培养基浇注混匀冷凝后，将培养皿②____________，并连续培养48 h
分离纯化
挑取③__________________________进行平板划线培养
长期保存
将菌种加入30%的甘油中在－20 ℃保存
(3)高产酸乳酸菌的鉴定。提取筛选乳酸菌的DNA，通常采用16SrDNA(编码 rRNA对应的DNA序列)的通用引物进行PCR扩增并测序鉴定。以16SrDNA作为细菌分类依据的原因是不同菌属的16SrDNA具有________。
(4)高产酸乳酸菌发酵效果检测。研究人员研究了两种高产酸乳酸菌(乳酸菌A50f7和A50b9)在发酵泡菜过程中pH的变化，结果如图所示。据图分析，该研究实验的自变量是________，可以看出，接种两种乳酸菌效果相近，其相近之处表现为______________________________。
答案　(1)①固体　蛋白胨、牛肉膏、酵母粉　②筛选高产酸乳酸菌　(2)①9 ml无菌水　②倒置　③有明显溶钙圈的菌落　(3)差(特)异性　(4)乳酸菌的种类和接种量(发酵时间)　均能快速降低泡菜发酵过程中的pH，且接种量越大作用效果越明显
解析　(1)琼脂是凝固剂，根据物理性质分类，该培养基属于固体培养基；氮源是指提供氮元素的物质，蛋白胨、牛肉膏、酵母粉含有氮元素，可为乳酸菌种提供氮源；培养基中含有碳酸钙，乳酸菌产生乳酸会与碳酸钙反应形成溶钙圈，便于筛选高产酸乳酸菌。(2)要分离和培养高产酸乳酸菌，首先对泡菜汁进行梯度稀释，稀释时需要用无菌水，如1 mL泡菜汁＋9 mL无菌水，相当于对泡菜汁稀释了10倍，以此类推；培养时为了防止冷凝水滴落冲散菌落，应将培养皿倒置培养；溶钙圈明显的菌落，产乳酸菌的能力强，应挑取有明显溶钙圈的菌落进行平板划线培养。(3)不同菌属的16SrDNA具有差(特)异性，PCR能鉴定不同的DNA，因此能采用16SrDNA(编码 rRNA对应的DNA序列)的通用引物进行PCR扩增并测序鉴定不同菌属。(4)自变量是人为改变的量，据图分析，该研究实验的自变量是乳酸菌的种类(乳酸菌A50f7和A50b9)和接种量(发酵时间)；结合图示结果可知，两种乳酸菌均能快速降低泡菜发酵过程中的pH，且接种量越大作用效果越明显，效果相近。