人教版高中生物考点35 微生物的培养技术及其应用（解析版）.docx

考点35 微生物的培养技术及应用
（精讲+精练）
目 录
知识点精准记忆
典 型 例 题 剖 析
微生物的培养技术及应用
微生物的选择培养和计数
易 混 易 错 辨 析
2022高 考 真 题 感 悟
五、高 频 考 点 精 练
第一部分：知 识 点 精 准 记 忆
微生物的培养技术及应用
1．培养基的配制
(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)用途：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
(3)类型：按物理状态分类
液体培养基：①特点：不含凝固剂，呈液体状态②用途：工业生产
固体培养基：①特点：含凝固剂(如琼脂)，呈固体状态②用途：微生物的分离、鉴定，活菌计数，菌种保藏
(4)成分
碳源：①特点：提供碳元素的物质②作用：构成生物体的细胞的物质和一些代谢产物，有些也是异养生物的能源物质③来源：无机碳源：CO2、NaHCO3等；有机碳源：糖类、牛肉膏等
氮源：①特点：提供氮元素的物质②作用：合成蛋白质、核酸等物质③来源：无机氮源：N2、NH3、铵盐、***盐等；有机氮源：蛋白胨等
无机盐：①特点：为微生物提供除碳、氮之外的各种重要元素，包括大量元素和微量元素②作用：为微生物提供无机营养，调节培养基的pH等③来源：无机化合物：KH2PO4、K2HPO4、NaCl等
水：①特点：生物体含量最高的无机化合物②作用：良好的溶剂，参与化学反应等③来源：培养基、代谢产物
（5）提醒：除了上述主要营养物质外，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。例如，在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性；在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。
2．无菌技术
(1)目的：获得纯净的培养物。
(2)关键：防止杂菌污染。
(3)区别：消毒与灭菌的比较
比较项目
条件
结果
常用方法
应用范围
消毒
较为温和的物理、化学或生物等方法
仅杀死物体表面或内部一部分微生物
煮沸消毒法
日常用品
巴氏消毒法
不耐高温的液体
化学药物消毒法
操作空间、操作者的衣物和手等
紫外线消毒法
接种室、接种箱或超净工作台
灭菌
强烈的理化方法
杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子
湿热灭菌法
培养基、容器等
干热灭菌法
玻璃器皿、
金属用具等
灼烧灭菌法
接种工具等
（4）提醒：选择无菌技术的原则：一要考虑无菌技术的效果，灭菌的效果比消毒要好；二要考虑操作对象的承受能力，活体生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能用灭菌
(5)其他操作
①做好消毒和灭菌工作后，要注意避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。
②为了避免周围环境中微生物的污染，接下来的许多操作都应在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行。
3．微生物的纯培养
(1)概念辨析
培养物：接种于培养基内，在适合条件下形成特定种类的微生物的群体
纯培养物：由单一个体繁殖所获得的微生物群体
菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部繁殖形成的肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体
纯培养：获得纯培养物的过程
酵母菌纯培养的操作步骤
(3)平板划线法操作步骤
（1）实验成功关键点
①第一次划线及每次划线之前都需灼烧接种环灭菌，划线操作结束仍需灼烧接种环。
②灼烧接种环之后，要等其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。
③在做第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样才能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
④划线时最后一区域不要与第一区域相连。
⑤划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。
（2）平板划线操作中几次灼烧接种环的目的
项目
第一次操作
每次划线之前
划线结束
目的
杀死接种环上原有的微生物
杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端，使每次划线菌种数目减少
杀死接种环上残存的菌种，避免微生物污染环境和感染操作者
二、微生物的选择培养和计数
1．区分选择培养基与鉴别培养基
1）.选择培养基：①特点：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长②用途：从众多微生物中分离所需的微生物③举例：加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
2）.鉴别培养基：①特点：根据微生物的代谢特点在培养基中加入某种指示剂或化学药品，进而产生特定的颜色或其他变化②用途：鉴别不同种类的微生物③举例：用伊红—亚甲蓝培养基鉴别大肠杆菌
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