人教2022年高考生物一轮复习 第11单元 第37讲　微生物的利用.docx

第37讲　微生物的利用
[目标要求]　1.微生物的分离和培养。2.某种微生物数量的测定。3.培养基对微生物的选择作用。
考点一　微生物的实验室培养
1．培养基
(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。
(3)种类
①按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。
②按功能可分为选择培养基和鉴别培养基。
2．无菌技术
(1)目的：获得纯净培养物。
(2)关键：防止外来杂菌的入侵。
(3)常用方法：灭菌和消毒。
(4)无菌技术的主要方法及适用对象(连一连)
教材中的隐性知识　源于选修1 P85附录4“高压灭菌的操作方法”
(1)灭菌桶装入待灭菌物品不要装太挤的原因是避免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果。
(2)加热灭菌锅时应打开排气阀，目的是排除锅内冷空气，之后，才能关上排气阀。
3．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
(1)计算
↓
(2)称量
↓
(3)溶化
↓
(4)灭菌
↓
(5)倒平板
4．纯化培养
(1)方法：平板划线法和稀释涂布平板法。
(2)菌落的概念：由单个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。
(3)平板划线法分离纯化大肠杆菌
①
接种
在装有液体培养基的三角瓶中接种大肠杆菌，在摇床上37 ℃下振荡培养12 h
②
划线
分离
用接种环在接种有大肠杆菌的三角瓶中沾取菌液一次，在固体培养基的平板上连续划线，盖好培养皿
③
培养
观察
将培养皿倒置，放在37 ℃恒温箱中培养12～24 h后，可看到划线的末端出现不连续的单个菌落
(4)稀释涂布平板法步骤
①系列稀释操作：该操作常用在将细胞接种到培养基之前，通过液体稀释的方法分散细胞，随着稀释程度的增大，单位体积中的微生物细胞数量减少，细胞得以分散。
操作步骤：
②涂布平板操作步骤
教材中的隐性知识　源于选修1 P18“旁栏小资料”
(1)微生物的接种方法除平板划线法和稀释涂布平板法外，还包括斜面接种、穿刺接种等方法。
(2)微生物接种的核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。
5．菌种的保藏方法
主要方法
临时保藏法
甘油管藏法
保藏对象
频繁使用的菌种
长期保藏的菌种
方法步骤
先接种到试管的固体斜面培养基上培养，然后放入4 ℃的冰箱中
转入灭菌后的甘油中，混匀后放在－20 ℃冷冻箱中保存
(1)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质(　√　)
(2)由于物理状态的不同，培养基只有液体培养基和固体培养基两种类型(　×　)
(3)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害(　√　)
(4)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌(　×　)
(5)配制培养基时应先灭菌再调pH(　×　)
(6)平板划线法中每一次划线后要将接种环灼烧(　√　)
(7)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上(　×　)
(8)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时，只要稀释度足够高，就能在培养基表面形成单个菌落
(　√　)
(9)斜面培养基中含有大量营养物质，可在常温下长期保存菌株(　×　)
(10)为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落(　×　)
源于选修1 P17～18讨论
(1)平板冷凝后，要将平板倒置，原因是可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染；避免培养基水分过快挥发。
(2)在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板不能用来培养微生物，原因是空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生，可能会造成污染
。
(3)平板划线法在做第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，原因是划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
1．选择培养基与鉴别培养基的比较
项目
选择培养基
鉴别培养基
制备方法
培养基中加入某些化学物质
培养基中加入某种指示剂或化学药品
原理
依据某些微生物对某些物质或环境条件的嗜好或抗性而设计
产生特定的颜色或其他变化
用途
从众多微生物中分离出所需的微生物
鉴别不同种类的微生物
2.消毒和灭菌的辨析
项目
条件
结果
常用方法
应用范围
消毒
较为温和的物理或化学方法
仅杀死物体表面或内部的部分微生物(