人教高中生物专题33 微生物的培养与利用（教师版）.docx

专题33　微生物的培养与利用
考点一、微生物的实验室培养
【要点速记】
1．培养基
（1）概念：人们按照微生物对_________的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
（2）种类：液体培养基和______________培养基，二者的区别为是否添加_____________。
（3）营养成分。
①主要营养物质：_____________、_____________、水和无机盐。
②其他条件：pH、_______________物质和氧气。
2．无菌技术
（1）目的：获得_______________________________。
（2）关键：防止___________________________的入侵。
（3）常用方法：_______________和_______________。
（4）无菌技术的主要方法及适用对象：
3．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：
（1）计算：依据配方比例，计算配制100mL的培养基时，各种成分的用量。
（2）称量：准确地称取各种成分。
（5）倒平板：待培养基冷却至___________℃左右时，在_____________倒平板。
4．纯化大肠杆菌
（1）菌落：由____________繁殖而来的肉眼可见的_____________群体。
（2）两种常用接种方法的比较：
常用方法
平板划线法
稀释涂布平板法
纯化原理
通过接种环在________________的表面_______________操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面
将菌液进行一系列的____________，然后将不同稀释度的菌液分别______________到琼脂固体培养基的表面，进行培养。稀释度足够高时，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞
主要步骤
_______________操作
系列稀释操作和涂布平板操作
接种工具
接种环
_______________
平板示意图
相同点
都能获得单细胞菌落
不同点
平板划线法不能对微生物计数，而稀释涂布平板法能对微生物计数
5．菌种的保藏方法
主要方法
临时保藏法
甘油管藏法
保藏对象
频繁使用的菌种
____________的菌种
方法步骤
先接种到试管的_________培养基上培养，然后放入_____________的冰箱中
转入灭菌后的_____中，混匀后放在_________冷冻箱中保存
【重难点突破】
1．培养基的配制原则“三要”
（1）目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。
（2）营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。
（3）pH要适宜：一般的细菌适合于中性环境生长，放线菌适合于偏碱性环境，而酵母菌和霉菌适合于微酸性环境，配制培养基时需要根据微生物的类群调节pH。
2．消毒和灭菌的比较
项目
条件
结果
常用方法
应用范围
消毒
较为温和的物理或化学方法
仅杀死物体表面或内部的部分微生物
煮沸消毒法
日常用品
巴氏消毒法
不耐高温的液体
化学药剂消毒法
用酒精擦拭双手，用***气消毒水源
紫外线消毒
接种室、接种箱、超净工作台等
灭菌
强烈的理化因素
杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子
灼烧灭菌法
接种工具等
干热灭菌法
玻璃器皿、金属用具等
高压蒸汽灭菌法
培养基、容器等
3．平板划线操作中灼烧接种环的目的
灼烧时间
灼烧目的
第一次划线前
杀死接种环上原有的微生物，防止外来杂菌污染培养基
第二次及以后每次划线前
杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端
最后一次划线后
杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者
考点二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
【要点速记】
1．筛选菌株
（1）寻找目的菌株的方法：根据它对____________的要求，到相应的环境中去寻找。
（2）实验室中微生物的筛选。
①方法：____________有利于目的菌株生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物生长。
②实例：筛选尿素分解菌时使用以________为唯一氮源的________培养基进行培养。
（3）选择培养基：在微生物学中，允许____________的微生物生长，同时____________其他种类微生物生长的培养基。
2．统计菌落数目
比较项目
间接计数法
直接计数法
（稀释涂布平板法）
（显微镜直接计数法）
原理
样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的___________活菌，通过